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            植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒實驗類型:夾心法

            更新時間:2018-12-26      瀏覽次數:2061

            植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒

            英文名稱:Plant IAA ELISA Kit
            實驗類型:夾心法
            檢測范圍:0.625 μmol/L – 20 μmol/L
            低檢測限:0.1 μmol/L
            應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

            實驗原理

            試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物吲哚乙酸(IAA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸(IAA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

             

            植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒組成

            試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
            微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
            標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
            樣本稀釋液6mL3mL
            檢測抗體-HRP10mL5mL
            20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
            底物A6mL3mL
            底物B6mL3mL
            終止液6mL3mL
            封板膜2張2張
            說明書1份1份
            自封袋1個1個
             

             

            操作步驟

            1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

            3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

            4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

            6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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