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            上海仁捷生物發布-豬(NGAL2)elisa檢測原理

            更新時間:2017-06-29      瀏覽次數:2001

            豬中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白2NGAL2試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包豬中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白2NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白2NGAL2)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

            試劑盒組成:

             

            名稱

            96孔配置

            48孔配置

            備注

            微孔酶標板

            8孔×12

            8孔×6

            標準品

            0.3mL*6管

            0.3mL*6管

            樣本稀釋液

            6mL

            3mL

            檢測抗體-HRP

            10mL

            5mL

            20×洗滌緩沖液

            25mL

            15mL

            按說明書進行稀釋

            底物A

            6mL

            3mL

            底物B

            6mL

            3mL

            終止液

            6mL

            3mL

            封板膜

            2張

            2張

            說明書

            1份

            1份

            自封袋

            1個

            1個

            1.  標準品濃度依次為:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

            2.  經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

             

            實驗結果計算

            所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度。(例如下圖)

             

            試劑盒性能

            •  檢測范圍7.5 pg/mL  240 pg/mL
            •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL
            •  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
            •  重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 
            •  

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